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行業聚焦

Taq酶中的“超級英雄”

時間:2017-09-26    作者:聯創生物醫藥信息部

從1983年Kary Mullis提出聚合酶連鎖反應方法至今已超過30年,PCR反應在實驗室中獲得了指數級別的發展,爲分子生物學帶來革命性的推進,並且這個革命仍在繼續爆發,絲毫沒有放緩的迹象。隨著PCR應用越來越多樣化,意味著研究者對于Taq酶功能的需求也越來越多樣化,一“酶”走天下的時代已一去不返。

當下分子生物學試劑市場基本上都是野生型的DNA聚合酶。隨著客戶實驗要求的提升和生物樣本複雜性的提高,野生型DNA聚合酶的局限性在許多實驗中也逐漸凸顯出來,如擴增效率低、特異性差、高AT或GC含量樣本擴增結果差、樣本中或PCR系統中的有些抑制劑對反應有幹擾等。

KAPA Biosystems專有的直接分子進化平台是一種高度可定制的蛋白質工程技術,能夠産生並篩選大量的酶突變體。野生型DNA聚合酶基因經過多輪的突變、篩選和擴增,最終獲得需要的優異特性,它們是Taq酶中的“超級英雄”:
·   對于模板中含有常見的PCR反應抑制物如糞便樣品等,KAPA2G Robust DNA聚合酶強健的合成力可以獲得更穩定的結果。
·   對PCR速度有高要求的話,KAPA2G Fast DNA聚合酶延伸速度高達1s/kb,並且具有高靈敏度、高特異性的特性。較傳統PCR反應可以節省大約75%的時間。
·   如果對qPCR實驗的靈敏度和速度有要求,KAPA SYBR FAST qPCR KITS中的Taq酶提高了對熒光染料的耐受性,可大大提高信號強度及反應的有效性。

     

下面就讓我們見識一下這些“超級英雄”的真正實力吧!

   
【快如一道閃電】

   
KAPA2G Fast DNA 聚合酶
通過野生型Taq酶改造的第二代工程酶,具有更高的合成能力和合成速度。
√   反應更快:PCR反應時間縮短75%。
√   合成能力更強:延伸時間縮短至1 sec/kb。
√   兼容更廣:兼容多種實驗樣本,甚至富含AT-和GC-的樣本。
√   靈敏度及産量更高

        

KAPA2G快速DNA聚合酶應用方案:小鼠基因型快速鑒定
KAPA2G快速DNA聚合酶每秒鍾擴增1kb的超凡速度可以在各個研究領域中發光發熱,例如用于小鼠基因型快速鑒定:

快速的樣本抽提+最快速KAPA2G DNA聚合酶,從樣本到結果,輕松實現1小時鑒定小鼠基因型!

  
KAPA2G快速DNA聚合酶擴展閱讀:
Stopped-flow DNA polymerase assay by continuous monitoring of dNTP incorporation by fluorescence
·   停流DNA聚合酶反應(Stopped-flow DNA polymerase assay)通過熒光染料實時監測dNTP的插入情況,證明KAPA2G快速DNA聚合酶是目前市場上最快速的聚合酶!
·   KAPA2G快速DNA聚合酶配合硬件實現的近瞬時加熱冷卻,三分鍾完成30個循環PCR反應,難以想象的快捷!

  
【強健看得見】

   
做過多年實驗的你已經深深體會到實驗就像人生一樣總是無法完美:
·   做了很多努力,DNA模板仍然無法完全去除抑制成分
·   模板序列GC或AT含量過高,你無法控制
·   不同來源、不同GC含量的多個DNA模板無法使用相同的PCR方案

但就如人生需要低頭奮力前行,實驗也需要不懈努力,還好有強健的KAPA2G Robust DNA聚合酶幫你分擔,共同克服這些PCR實驗條件的不完美。

  
KAPA2G Robust DNA聚合酶
基于野生型Taq酶進化改造的第二代工程酶,用于解決廣泛擴增子類型(富含GC或AT)不一致的擴增問題。適合于挑戰性的PCR應用和困難樣本的擴增,顯著降低嘗試多種酶帶來的高消費和不斷優化擴增方案浪費的時間。
√   合成能力強:耐受PCR體系中的抑制成分,兼容多種實驗樣本。優化粗制樣本、FFPE樣本、富含AT-和GC-樣本、菌落PCR反應。
√   延伸速度比野生型Taq酶更快:延伸時間縮短至15-30 sec/Kb,幫助實驗者更快的獲得結果。
√   靈敏度和産量更高:對于樣本量有限或模板含量低的實驗尤其適用。

                   

工欲善其事,必先利其器。科學研究亦是如此,好的工具可以幫助實驗事半功倍,化繁爲簡,爭分奪秒!

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